有些材质的塑料不能采用高压灭菌,操作前请确认,灭菌时容器的盖子要松开,以免瓶中压力增大,塑料离心管盖子太紧灭菌后空气骤冷时真空会造成离心管变形。某些成分的溶液高温高压灭菌会造成物质沉淀、变色和分解,灭菌前请确认该溶液的正确除菌方式。
使用立式高压灭菌器时需要先将内层灭菌桶取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。一般来说每次灭菌前都应该加水。加水不能太少,否则会引起烧干或者爆裂。加水加去离子水或蒸馏水,这样产生的水垢少些,而锅体也不易被腐蚀。
放回灭菌器的灭菌桶,并装入待灭菌物品,注意不要装得太挤,以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。加盖,并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。
用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气*排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。
立式高压灭菌器灭菌所需要的时间到了之后,切断电源或关闭煤气,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的压力降至0时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。如果压力未降到0时,打开排气阀,就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染。将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24小时,经检查若无杂菌生长,即可待用。